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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的重要組成部分，實(shí)施安樂死是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的重要內(nèi)容之一。如前所述，我國也已對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂死提出明確要求。本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂死在實(shí)施層面還存在欠缺，現(xiàn)就調(diào)查中發(fā)現(xiàn)的問題進(jìn)行討論并提出相應(yīng)建議。

安死術(shù)在論文撰寫和發(fā)表層面被忽視

本研究納入的890篇文獻(xiàn)中僅有2篇文章提到 “安死術(shù)”和“ 安樂死”，占0.22%（2／890）；僅有39.44%的文章明確提到小鼠處死方法。 提到處死方法的文獻(xiàn)對(duì)小鼠處死方法的描述也不夠嚴(yán)謹(jǐn)，如窒息法處死、引頸處死、脫頸活殺等。麻醉劑種類對(duì)過量麻醉處死小鼠技術(shù)是核心內(nèi)容，但提到麻醉劑種類的只占53.33%。作者認(rèn)為各學(xué)術(shù)雜志應(yīng)通過加強(qiáng)論文發(fā)表環(huán)節(jié)福利倫理要求，以規(guī)范動(dòng)物實(shí)驗(yàn)論文撰寫，進(jìn)而促進(jìn)我國科學(xué)安樂死在實(shí)際工作的實(shí)施。

頸椎脫臼和斷頭是使用率較高的兩種方法

這兩種方法都屬于物理方法，當(dāng)有動(dòng)物體重限制并且由有經(jīng)驗(yàn)和操作熟練的人實(shí)施時(shí)使用物理方法是人道的。歐盟指令2010/63/EU提出，在無其他方法的前提下可接受斷頭處死嚙齒類動(dòng)物。美國獸醫(yī)協(xié)會(huì)（AmericanVeterinaryMedicalAssociation,AVMA）指南指出“頸椎脫臼和斷頭”一定條件下對(duì)大鼠（體重＜200ｇ）和小鼠是可以接受的。所指條件集中在操作層面，包括:（1）人員需經(jīng)過培訓(xùn)；（2）由技術(shù)熟練和過關(guān)的人員實(shí)施；（3）相關(guān)設(shè)備（主要針對(duì)斷頭法）必須合適。英國《動(dòng)物法案》要求頸椎脫臼處死前，需進(jìn)行鎮(zhèn)靜或麻醉。 頸椎脫臼法的缺點(diǎn)為不是每次操作都會(huì)使動(dòng)物迅速死亡，有時(shí)動(dòng)物會(huì)恢復(fù)呼吸／意識(shí)，還存在意識(shí)和感覺，而這正是動(dòng)物痛苦的根源。Carbone等的研究，使用三種造成頸椎脫臼的方法即（1）操作者一手固定尾部，另一手按住動(dòng)物頸部做扭轉(zhuǎn)動(dòng)作；（2）用止血鉗輔助；（3）胸椎部脫臼（實(shí)施頸椎脫臼時(shí)可能發(fā)生這種意外情況），結(jié)果顯示成功率最高的第一種方法，尚有10%（2／22）的動(dòng)物在實(shí)施頸椎脫臼后持續(xù)呼吸180s以上。綜上所述，頸椎脫臼方法處死小鼠是可以的，但操作者技能必須合格，實(shí)施后必須確認(rèn)動(dòng)物的死亡。

使用過量麻醉劑進(jìn)行安樂死

調(diào)查中使用較多的戊巴比妥鈉和苯巴比妥鈉屬于巴比妥類藥物。該類藥物抑制呼吸中樞，過量深度麻醉可導(dǎo)致窒息并伴有心臟驟停，能使動(dòng)物安靜死去，產(chǎn)生的不適感輕。腹腔注射戊巴比妥鈉會(huì)因腹膜刺激反應(yīng)而引起疼痛，故由技術(shù)熟練的人員靜脈注射效果該類藥物效果最好。三溴乙醇屬于醇類物質(zhì)，通過抑制神經(jīng)系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)引起麻醉和缺氧，最終導(dǎo)致死亡。三溴乙醇可用于小鼠安樂死，但如用于更大動(dòng)物安樂死，所需用量過大、不易實(shí)現(xiàn)。水合氯醛通過抑制呼吸中樞進(jìn)而血氧不足而引起死亡，動(dòng)物會(huì)伴有喘息、肌肉痙攣并發(fā)出聲音。因其不良反應(yīng)嚴(yán)重，美國AVMA不推薦用于安樂死藥物。乙醚具有刺激性、易燃易爆的特性，也不推薦用于安樂死。使用該方法安樂死時(shí)需強(qiáng)調(diào)的是：針對(duì)不同物種，選用合適的麻醉劑、劑量濃度和給藥途徑。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中存在動(dòng)物麻醉后進(jìn)行解剖取材的情況，動(dòng)物由于失去組織、臟器或大量失血而死亡

實(shí)驗(yàn)期間需密切觀察動(dòng)物反應(yīng)，確保動(dòng)物在手術(shù)中瀕死期免遭痛苦：（1）確保動(dòng)物進(jìn)入深度麻醉后再進(jìn)行操作；（2）操作者技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)熟練；（3）手術(shù)前制定麻醉方案，避免術(shù)中動(dòng)物遭受更多的痛苦；（4）觀察動(dòng)物的狀態(tài)，避免動(dòng)物有知覺時(shí)進(jìn)行手術(shù)。

二氧化碳窒息法

盡管此次調(diào)查僅有2篇文章使用該方法處死小鼠，但鑒于二氧化碳窒息法處死動(dòng)物的效率高，操作者的心理負(fù)擔(dān)較小，近年來有大量介紹和推薦使用二氧化碳窒息法的文章，現(xiàn)實(shí)中二氧化碳窒息法的使用也有擴(kuò)大的趨勢。但新研究表明，嚙齒類動(dòng)物對(duì)二氧化碳有明顯的厭惡感，高于一定濃度的二氧化碳會(huì)造成動(dòng)物的疼痛。國際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利權(quán)威組織也認(rèn)同這一看法，故要求執(zhí)行二氧化碳窒息法，須嚴(yán)格控制氣體濃度升高的速率。AVMA要求二氧化碳置換率為每分鐘10%～30%容器體積，以保證在引起疼痛之前，動(dòng)物已失去意識(shí)。而目前市面部分二氧化碳窒息機(jī)不能精確控制進(jìn)氣量，一些自制儀器也存在這一問題。 故作者建議，應(yīng)嚴(yán)格選用可控制氣體流速的二氧化碳窒息設(shè)備實(shí)施安樂死，條件不滿足時(shí)不應(yīng)使用。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安死術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員心理健康的影響

對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)施科學(xué)而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌矘匪?，也是?duì)實(shí)驗(yàn)人員的一種保護(hù)，特別是心理上的。 當(dāng)某些工作人員要較高頻率地處死動(dòng)物或作為旁觀人員面臨處死動(dòng)物的場景時(shí)，經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生消極、厭惡情緒，影響心理健康。 而當(dāng)采用認(rèn)可的安樂死方法處死動(dòng)物時(shí)，能顯著降低這種消極、負(fù)面的心理影響。

綜上所述，簡單評(píng)價(jià)某種處死方法是否為安死術(shù)是困難的，也是不科學(xué)的。選擇適合的安死術(shù)需從動(dòng)物種類、動(dòng)物遭受的疼痛和痛苦、人員安全性、成功率、藥物獲得方式、對(duì)操作者情緒影響等多方面考慮。實(shí)際工作中，選擇適合的安死術(shù)還需由獸醫(yī)結(jié)合現(xiàn)實(shí)情況從專業(yè)角度做出判斷。選定方法后，由掌握技術(shù)要點(diǎn)、操作熟練的人員實(shí)施安死術(shù)也至關(guān)重要，包括動(dòng)物的抓取與保定、靜脈穿刺、麻醉劑劑量以及二氧化碳流速、安樂死箱的用法等。故全面提高我國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利，真正仁慈地結(jié)束實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生命，制定政策法規(guī)僅為第一步，還需要加強(qiáng)相關(guān)技術(shù)的研究和培訓(xùn)，讓實(shí)驗(yàn)人員切實(shí)掌握安死術(shù)。

原文作者：岳東旭，池宏偉，鹿雙雙，王昕肪，孫德明，劉曉宇，盧選成

原創(chuàng)單位：中國疾病預(yù)防控制中心, 國家衛(wèi)生計(jì)生委科學(xué)技術(shù)研究所

發(fā)表雜志：中國比較醫(yī)學(xué)雜志2017年 11月 第27卷 第11期