- 脂肪組織切片制備方法的改進(jìn)
脂肪組織包括白色脂肪組織和棕色脂肪組織,白色脂肪組織和棕色脂肪組織在能量代謝中發(fā)揮著截然相反的作用。白色脂肪組織主要通過甘油三酯儲存能量,而棕色脂肪組織則通過產(chǎn)熱消耗能量。近年來科學(xué)家們越來越重視對脂肪組織的研究。脂肪組織結(jié)構(gòu)特殊,含有較多的油脂成分,無論是冰凍切片還是石蠟包埋制片都較其它組織困難,傳統(tǒng)的處理方法往往不能制備出完整的切片,影響對其組織結(jié)構(gòu)的觀察,對后續(xù)研究造成困難,為了解決這一問題,中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)病理分析平臺科研人員不斷摸索,對脂肪組織石蠟切片和冰凍切片進(jìn)行了改進(jìn)。提高了脂肪組織的制片質(zhì)量。文章發(fā)表在《中國比較醫(yī)學(xué)雜志》2017年第一期。
制備石蠟切片
取脂肪組織迅速固定于10%中性福爾馬林中,設(shè)置不同的脫水程序(表1)制備石蠟切片,HE染色(圖1,圖2)。免疫組化法觀察PPARγ和ITLN1的表達(dá)(圖3)。
制備冰凍切片
若研究脂滴,先取脂肪組織迅速固定于甲醛鈣或10%中性福爾馬林固定液中24 h以上,OCT包埋,置于-80℃冰箱至少30 min,設(shè)置冰凍切片機(jī)箱體溫度-20℃,樣品頭溫度-30℃,切片后再用冷甲醛鈣固定15min后放-20℃?zhèn)溆?。若不研究脂滴,僅需要在10%中性福爾馬林中固定即可,切片再用冷丙酮固定15min后放-20℃保存?zhèn)溆?。石蠟切片與冰凍切片HE染色比較見圖4。
改進(jìn)的脂肪組織石蠟切片和冰凍切片均可成功應(yīng)用于不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,為脂肪組織的研究提供了有力的支撐條件。
文章來源
徐玉環(huán),徐艷峰,劉穎,黃瀾,于品,韓云林,李彥紅,趙文杰,鄧巍,秦川,朱華.脂肪組織切片制備方法的改進(jìn). 中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2017,27(1):79-84